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以下是為內部質量控制或定期檢查而設計的標準化操作步驟。如果您的移液器用于關鍵實驗或需要出具認證報告,強烈建議送至專業機構。通過稱量移液器分配的超純水的重量,結合當前溫度下的水密度,計算出實際移液體積,與目標體積對比,計算誤差。
一、艾本德十二道移液器校準前準備
1、環境與設備:
(1)環境條件: 在無風、穩定的實驗臺上進行。室溫控制在20-25°C,濕度>45%。確保移液器、超純水、天平、容器在同一房間內靜置平衡至少1-2小時,使溫度一致。
(2)天平: 使用高精度分析天平(例如,對于10μl量程,天平精度應達到0.001mg;對于100μl及以上,0.01mg即可)。天平必須水平,并經過校準。
(3)液體: 新鮮制備的去離子水/超純水。
(4)(容器: 小型、干凈的稱量容器(如PCR管、小燒杯)。使用前用水潤洗內壁,以盡量減少靜電和蒸發影響。
(5)溫度計: 精確測量水溫和室溫。
(6)數據記錄表: 準備記錄表格。
2、移液器準備:
(1)確保移液器外觀清潔,無液體殘留。
(2)檢查吸頭推桿、量程鎖等機械部件是否正常。
(3)使用與移液器匹配的、高質量的帶濾芯吸頭,確保氣密性。
二、艾本德十二道移液器校準步驟
由于是多道移液器,校準需檢查整排通道的一致性以及單個代表性通道的準確性。
1、通道一致性測試(快速檢查)
(1)設定體積: 將移液器設定到其中間量程(例如,對于10-100μl的移液器,設為50μl)。
(2)預潤濕: 安裝新吸頭,吸取并排空水3-5次,使吸頭內壁形成穩定的水蒸氣飽和層。
(3)一致性測試: 用移液器吸取一排水,然后垂直、緩慢地將所有通道的液體同時排入一個裝有少量水的培養皿或槽中,觀察液滴大小是否均勻一致。如有明顯大小不一,說明通道可能有堵塞或泄漏,需先維護。
(4)稱重檢查(可選): 也可以準備一個長條形容器,在分析天平上逐排稱量每排分配的水重(需快速操作),粗略比較各排體積是否一致。
2、單通道精確校準(稱重法)
選擇中間位置的一個通道(如第6道) 作為代表性通道進行詳細校準。
(1)設定校準點: 通常選擇三個點:
接近最小量程(如滿量程的10%)
中間量程(約50%)
接近MAX量程(100%)
例如:對于10-100μl移液器,可選擇10μl, 50μl, 100μl。
(2)執行稱重(每個體積點重復10次測量):
a、將天平歸零,放上裝有少量水的稱量容器(用于增加濕度,減少蒸發)。
b、對目標通道安裝新吸頭,預潤濕(吸放液體3次)。
c、吸取設定體積的水。
d、將吸頭頂部以特定角度(通常15-30度) 浸入稱量容器液面以下約1-2mm,緩慢、勻速地排液,等待約1秒后,沿容器內壁滑出(確保排盡,不掛滴)。
e、立即蓋上防風罩,記錄天平穩定后的讀數(mg)。
f、記錄當時的水溫(精確到0.1°C)。
g、清空、擦干容器,天平歸零,重復步驟b-f,共10次。
三、調節(僅在校準失敗后進行)
調節需要專用工具(通常隨新移液器附帶或可單獨訂購),且要求操作者有一定經驗。不當調節可能損壞移液器。
1、打開調節窗: 在移液器頂部或手柄下方找到調節孔/窗。
2、使用專用工具: 插入合適的六角扳手或調節工具。
3、調節:
(1)如果所有體積點都偏大,順時針旋轉調節螺絲。
(2)如果所有體積點都偏小,逆時針旋轉調節螺絲。
(3)微調原則: 每次只旋轉1/8圈(45度)左右,然后重新測試中間量程的體積。反復微調,直至該點準確。
(4)調好中間點后,必須重新檢查最小和MAX量程點,因為三點可能無法線性。理想情況下,三點應都達標。
4、鎖定: 調節完畢后,確保調節窗關閉或鎖緊。
四、記錄與報告
1、記錄所有原始數據、計算結果、環境條件、操作人員、日期。
2、明確給出校準結論(合格/不合格)。
3、如果進行了調節,記錄調節前后的數據。
4、為移液器貼上標簽,注明下次校準日期(通常建議每6-12個月校準一次,高頻使用需縮短周期)。
五、注意事項與提示
1、動作標準化: 操作者的移液節奏和角度必須一致,這是保證精密度(CV)的關鍵。
2、蒸發是誤差來源: 動作要迅速,使用帶濾芯吸頭、容器內保持高濕度環境。
3、Research plus特性: 該系列具有量程鎖定功能,校準時請確認鎖定狀態。其8通道移液器吸頭座可旋轉,請確保在垂直位置校準。
4、若多通道均不合格: 如果一致性差且多通道校準失敗,可能是移液器內部密封圈磨損或活塞污染,建議直接聯系艾本德進行專業維修和全面校準。