這是一份詳細的、結構化的伯樂MicroPulser電穿孔儀技術參數及使用說明綜合指南。

一、伯樂MicroPulser 電穿孔儀概述

MicroPulser是伯樂（Bio-Rad）公司推出的一款臺式、緊湊型電容式電穿孔儀。它專為高效的細菌轉化（尤其是大腸桿菌）而優化設計，同時也可用于酵母、分枝桿菌等微生物的電轉化。其核心特點是操作簡單、預設程序豐富、重復性好。

二、伯樂MicroPulser 電穿孔儀技術參數

類型：電轉化儀

尺寸（長x寬x高）：29x21x8 cm

重量：2.9 kg

電源：240W（在短時間充電時）

輸出：電壓： 100–120 V 或 220–240 V

預設程序：5 種桿菌，5 種真菌

工作溫度：3.5–35°C

輸出電壓和脈沖時間調節：電壓可調范圍為 200–3,000 V，精度為 10 V；5 ms 默認值，或 1–4 ms，精度 0.1 ms。

輸出:波型：帶 RC 時間常數的衰變或斜截衰變指數波型MAX輸出

電壓和電流 3,000 V 峰值，>600 W 負載，峰值MAX電流 100 A

產地：新加坡

三、伯樂MicroPulser 電穿孔儀控制面板與組件

1、電源開關：位于儀器背面。

2、顯示屏：LED顯示窗口，顯示選擇的程序代碼和狀態。

3、程序選擇按鈕 (P1-P7)：按下選擇對應的預設程序。

4、電阻/時間常數旋鈕：旋轉選擇 Low, Med, High, ∞ 檔位。

5、脈沖按鈕 (紅色Pulse按鈕)：按下以釋放電脈沖。按鈕上方的指示燈在充電和放電時會亮起。

6、電擊杯槽：容納1 mm電擊杯的插槽。

7、安全蓋：帶互鎖開關的透明蓋，必須蓋緊才能工作。

四、標準操作流程

1、選擇程序：按下 P1, P2 或 P3 按鈕（根據所用感受態細胞類型選擇，常用P1或P2）。顯示屏顯示相應代碼。

2、設置電阻：將電阻旋鈕旋至 “High" 位置（這是大多數大腸桿菌轉化如DH5α的標準設置，提供~2.2 ms時間常數）。

3、放入樣品：用吸水紙擦干電擊杯外壁，迅速放入儀器電擊杯槽內。

4、啟動脈沖：用力蓋緊安全蓋，直到聽到“咔噠"聲，表示互鎖裝置激活。立即按下紅色的 “Pulse" 按鈕。你會聽到一聲蜂鳴，同時指示燈閃爍。

5、取出樣品：脈沖結束后（<1秒），立即打開蓋子，迅速取出電擊杯。

6、細胞復蘇：立即向電擊杯中加入 1 ml 預熱的SOC或LB復蘇培養基，用移液器輕輕吹吸混勻。將混合液轉移至無菌離心管中。

7、培養與涂板：將離心管置于37°C搖床，150-200 rpm復蘇培養45-60分鐘。取適量菌液涂布在含相應抗生素的平板上，倒置培養過夜。

五、重要注意事項與維護

1、安全重要性：

確保電擊杯外壁和樣品槽內干燥，以防短路和電弧。

放電時切勿觸碰電擊杯或打開安全蓋。

只能使用伯樂原廠或認證的1 mm電擊杯。

2、操作關鍵：

所有組件（細胞、DNA、電擊杯）必須預冷（冰上操作）。

細胞與DNA混合物中應避免高濃度鹽分，否則會引起電弧。推薦使用超純水或TE buffer稀釋DNA。

從冰上取出到放電的間隔應盡可能短（<30秒）。

脈沖后立即進行復蘇，這對細胞存活重要。

3、故障排除：

無脈沖/指示燈不亮：檢查電源、安全蓋是否蓋緊、電擊杯是否放好。

產生電弧（火花）：檢查樣品是否有鹽分或雜質、電擊杯是否潔凈干燥、電擊杯是否破損。

轉化效率低：優化DNA用量和純度；嘗試不同的電阻設置（如從High調至Med）；檢查感受態細胞質量。

4、潔與維護：

關閉電源并拔掉插頭后進行清潔。

用蘸有70%乙醇的軟布擦拭儀器外部和電擊杯槽內部。切勿讓液體滲入儀器內部。

保持儀器在干燥清潔的環境中。