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技術文章

thermo賽默飛QubitFlex熒光計可以做哪些實驗?

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賽默飛Qubit™ Flex熒光計的功能。這是一款非常受歡迎的專業型核酸和蛋白定量儀器,其核心優勢在于高通量、高精度和專一的檢測。簡單來說,Qubit Flex熒光計主要用于對DNA、RNA、microRNA、蛋白質等生物分子進行精確定量。它無法像酶標儀那樣進行復雜的細胞學或生化實驗,但在定量方面,它比普通紫外分光光度計(如NanoDrop)更準確、更靈敏。


一、賽默飛QubitFlex熒光計核心功能:精確定量

與通過吸光度(A260)測算的儀器不同,Qubit Flex使用熒光染料技術,這些染料只與特定的目標分子(如雙鏈DNA)結合并發光,因此幾乎不受鹽、溶劑、游離核苷酸或降解物(如單鏈核酸)的干擾,結果非常可靠。

1、核酸定量:

dsDNA (雙鏈DNA):這是常用的功能,用于定量下一代測序(NGS)文庫、PCR產物、質粒DNA、基因組DNA等。準確性對NGS文庫的 pooling 至關重要。

ssDNA (單鏈DNA):定量用于測序的單鏈DNA文庫。

RNA:定量用于轉錄組學分析(如RNA-Seq)、qRT-PCR的高質量RNA樣品。

microRNA:專門定量低濃度的microRNA樣品,這對于miRNA研究非常重要。

2、蛋白質定量:

使用特定的蛋白質熒光染料,精確定量溶液中的蛋白質濃度。這對于需要精確蛋白上樣量的實驗(如Western Blot、蛋白質色譜)非常有用。


二、Qubit Flex 的核心特點和優勢

除了基礎的定量功能,Qubit Flex之所以叫“Flex"(靈活),是因為它擁有以下突出特點:

1、高通量:

支持8聯排管,一次最多可以檢測8個樣品,非常適合需要處理大量樣品的實驗室,如核心測序平臺、基因檢測公司等,大大提升了效率。

2、出色的靈敏度和檢測范圍:

靈敏度高,僅需1-20 μL的微量樣品。

可以檢測非常低濃度的樣品(如低至10 pg/μL的DNA),這是普通紫外分光光度計無法做到的。

3、自動化與信息化:

大尺寸觸摸屏界面,操作直觀。

實驗結果可以直接導出數據表或生成PDF報告,方便記錄和追溯。

內置條形碼掃描器,可以直接掃描樣品管上的條碼,將樣品信息與檢測數據自動關聯,極大減少了人為錯誤,特別符合GLP/GMP實驗室對數據完整性的要求。

4、預編程實驗程序:

儀器內置了所有常用的檢測程序(如dsDNA HS, RNA HS, Protein等),用戶只需選擇對應的 assay,儀器會自動設置好參數。


三、典型應用場景

1、下一代測序(NGS):在構建完測序文庫后,必須對每個文庫進行精確定量,以確保不同文庫以等摩爾量混合進行上機測序。這是Qubit Flex最關鍵的應用場景。

2、熒光定量PCR(qPCR, dPCR):在運行qPCR實驗前,精確測定模板DNA或cDNA的濃度,以確保上樣量的準確性,獲得可靠的Ct值。

3、蛋白質組學:在Western Blot、蛋白質純化等實驗前,精確測定蛋白質樣品濃度。

4、質量控制(QC):作為實驗室樣品質量控制的環節,確保用于下游實驗的樣品在濃度上符合要求。


Qubit Flex熒光計是分子生物學和基因組學實驗室中用于樣品精確定量和質量控制的“黃金標準"儀器之一。 如果您的工作流程涉及大量需要精確濃度的核酸或蛋白質樣品,那么Qubit Flex是一個非常理想的選擇。

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